本試劑盒采用探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，設(shè)計(jì)一對(duì)EB病毒特異性引物，結(jié)合一條特異性探針，用熒光PCR技術(shù)對(duì)EB病毒的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè)，用于臨床上對(duì)病原學(xué)輔助診斷。

　　1DNA提取

　　1)對(duì)上述處理好的標(biāo)本加入等體積核酸提取液（固體標(biāo)本加入50μL核酸提取液），100℃恒溫處理10min，13,000rpm離心5min，取上清液轉(zhuǎn)移至新的1.5mLEP管，-20℃保存；

　　2)DNA的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒（離心柱提取法），請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

　　?

　　2.探針?lè)≒CR檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法的局限性

　　a.樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān)；

　　b.樣本提取過(guò)程中沒(méi)有控制好交叉污染，會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；

　　c.陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏，會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果；

　　d.病原體在流行過(guò)程中基因突變、重組，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

　　f.試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果；

　　g.本檢測(cè)結(jié)果僅供參考，如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段。

　　結(jié)果判斷

　　陽(yáng)性：檢測(cè)通道Ct值≤35.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線。

　　可疑：檢測(cè)通道Ct值>35.0，且出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn)，重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)Ct值≤35.0和典型擴(kuò)增曲線者為陽(yáng)性，否則為陰性。

　　陰性：樣本檢測(cè)結(jié)果無(wú)Ct值且無(wú)明顯的擴(kuò)增曲線。