PCR反應得以進行并釋放熒光信號。利用熒光定量PCR儀對PCR過程中相應通道信號進行實時監(jiān)測和輸出，實現檢測結果的定性分析。
1.試劑準備（試劑準備區(qū)）
?。?）從冰箱中取出試劑盒,從試劑盒中取出實驗所需試劑，充分融化混勻并瞬時離心以去除管壁附著液體。
?。?）核算當次實驗所需要的反應數（n），并根據如下表所示反應體系計算當次實驗所需要的各種試劑量。
?。?）在無菌離心管中加入上述試劑，充分混勻后瞬時離心。按照20μL/管分裝量將試劑分裝至PCR反應管。
2.樣本準備（樣本處理區(qū)）
用QIAGEN、Roche公司RNA提取試劑盒提取RNA，具體操作按照其試劑盒說明書操作。
3.加樣
在上述制備好的PCR反應樣本管中分別加入處理好的待測標本RNA各5μL、終體積25μL/管，蓋好PCR反應蓋混勻后瞬時低速離心，轉移到PCR儀器上。陰性對照和陽性對照管則各加5μL試劑盒自帶的陰性對照或陽性對照品，終體積為25μL/管，蓋好PCR反應蓋混勻后瞬時低速離心，轉移到PCR儀器上。
4.PCR（PCR擴增區(qū)）
取樣本處理區(qū)準備好的PCR反應管，放置在實時熒光定量PCR儀樣品槽相應位置，并記錄放置順序。
以上就是PCR檢測試劑盒的檢驗方法，希望能對您有所幫助
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