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  • 2021

    3-24

    番鴨細(xì)小病毒PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長(zhǎng)度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。③引物堿基:G+C...

  • 2021

    3-23

    溶血性曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒使用方法:一、溶血性曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒樣品RNA的制備1、用自選方法抽提病毒樣品RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒RNAout2、或柱式病毒RNAout。二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成cDNA1.按下表配制RT反應(yīng)體系(20μL體系)2.70℃保溫5分鐘變性模板后立即冰浴。3.嚴(yán)格按順序加入6μLRTBuffer(含dNTP)和2μLMMLV逆轉(zhuǎn)錄酶(含RI),反應(yīng)終體積為20μL。4.42℃保溫60分鐘。此步為RT反應(yīng)。5.70℃保...

  • 2021

    3-18

    同詹姆士城峽谷病毒PCR檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋...

  • 2021

    3-17

    乳酸桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬...

  • 2021

    3-16

    卡他莫拉菌PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長(zhǎng)度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。③引物堿基:G+C含...

  • 2021

    3-11

    跳躍病病毒PCR檢測(cè)試劑盒使用方法:一、樣品RNA的制備1、用自選方法抽提病毒樣品RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒RNAout2、或柱式病毒RNAout。二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成cDNA1.按下表配制RT反應(yīng)體系(20μL體系)2.70℃保溫5分鐘變性模板后立即冰浴。3.嚴(yán)格按順序加入6μLRTBuffer(含dNTP)和2μLMMLV逆轉(zhuǎn)錄酶(含RI),反應(yīng)終體積為20μL。4.42℃保溫60分鐘。此步為RT反應(yīng)。5.70℃保溫10分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰...

  • 2021

    3-10

    大森林埃博拉病毒PCR檢測(cè)試劑盒操作流程:1.根據(jù)要保存的各樣本的體積,計(jì)算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍(如100mg組織約用1mlRNAwait);離心收集2×106細(xì)胞RNAwait的用量是1ml。2.將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中;3.快速將較大的組織切成厚度4.保存時(shí)先將樣本浸入RNAwait后置4℃冰箱過(guò)夜(4℃過(guò)夜是必需的,這樣可使RNAwait*滲入到組織中),然后轉(zhuǎn)移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃時(shí)...

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